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慢病毒構(gòu)建原理

慢病毒載體（Lentivirus）是一類改造自人免疫缺陷病毒（HIV）的病毒載體，是逆轉(zhuǎn)錄病毒的一種，基因組是RNA，其毒性基因已經(jīng)被剔除并被外源性目的基因所取代，屬于假型病毒。可利用逆轉(zhuǎn)錄酶將外源基因整合到基因組中實現(xiàn)穩(wěn)定表達，具有感染分裂期與非分裂期細胞的特性。◆慢病毒基因組進入細胞后，在細胞漿中反轉(zhuǎn)錄為DNA，形成DNA整合前復合體，進入細胞核后，DNA整合到細胞基因組中。整合后的DNA轉(zhuǎn)錄成mRNA，回到細胞漿中，表達目的蛋白；或產(chǎn)生小RNA。慢病毒介導的基因表達或小...

帶你學會一種藥物研究利器——等溫滴定量熱法

等溫滴定量熱法(IsothermalTitrationCalorimetry,ITC)是近年來發(fā)展起來的一種研究生物熱力學與生物動力學的重要方法，它通過高靈敏度、高自動化的微量量熱儀連續(xù)、準確地監(jiān)測和記錄一個變化過程的量熱曲線，原位、在線和無損傷地同時提供熱力學和動力學信息。ITC檢測方式與化學反應中的酸堿滴定法相似，在ITC測定中，首先將一種反應物置于一個溫控樣品池中，并通過一個熱電偶回路與一個參比池相偶聯(lián)，樣品池和參比池處于相同的外部環(huán)境。特定的滴定劑（按實驗需要選擇）定...

NK細胞是屬于什么細胞呢？

NK（自然殺傷細胞）通過整合識別MHCI分子的激活和抑制類受體的信號對靶點進行識別，對靶細胞進行直接殺傷，同時不損傷自身健康細胞。人體NK細胞占血液和其他部位中淋巴細胞的5%-20%，含量豐富，在抗病毒和抗腫瘤免疫中發(fā)揮關(guān)鍵作用。NK是控制急性和慢性病毒感染所必需的，同時NK能夠促進多種腫瘤直接裂解，在不同部位巡邏防止轉(zhuǎn)移。NK細胞功能的多面性顯示出其在免疫介導的保護和內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)平衡中具有動態(tài)作用。根據(jù)CD56和抗體結(jié)合Fc受體CD16的表達水平，人類NK可細分為成熟度和功能...

抗痩素納米抗體制備及篩選

瘦素是一種與能量代謝、免疫、生殖等相關(guān)的多功能細胞因子，其在血液中的含量異常會導致肥胖、營養(yǎng)不良、心血管疾病、腫瘤、肝病等多種疾病，特別是終末期腎衰患者廣泛存在瘦素水平過高的問題，由此導致腎衰癥患者營養(yǎng)不良、高血壓、胰島素抵抗等并發(fā)癥，這些并發(fā)癥嚴重影響了患者的生活質(zhì)量，因此開發(fā)特異性抗體實現(xiàn)瘦素水平的檢測與去除將具有非常重要的臨床意義。納米抗體由于其諸多優(yōu)良特點，成為該方面研究的選擇。獲得足夠量的抗原是進行抗體篩選的前提，由于血液中瘦素含量較低，進行了瘦素的制備，然后進行抗...

為什么大多數(shù)細胞培養(yǎng)需要二氧化碳培養(yǎng)箱

細胞培養(yǎng)基的pH一般在7.0-7.4之間。由于碳酸鹽pH緩沖體系是一種生理pH緩沖體系(是人體血液中最重要的pH緩沖體系)，大多數(shù)培養(yǎng)基都是用它來維持穩(wěn)定的pH值，用粉末配制培養(yǎng)液時，往往需要加入一定量的碳酸氫鈉。對于大多數(shù)以碳酸鹽作為pH緩沖體系的培養(yǎng)液，為了維持穩(wěn)定的pH，培養(yǎng)箱中的二氧化碳需要維持在2-10%之間，以維持培養(yǎng)液中溶解的二氧化碳濃度。同時，用于細胞培養(yǎng)的容器需要一定程度的通風，以便于氣體的交換。使用其他pH緩沖系統(tǒng)是否不需要二氧化碳培養(yǎng)箱？已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，由于空...

警惕！細胞系的交叉污染可能是毀掉你實驗的元兇

您是否有過這樣的經(jīng)歷……新買到的細胞或者實驗室傳了幾代的細胞，又或者是儲存于超低溫冰箱幾年不用的細胞，需要用到時腦海里一直有著這樣的問題困擾著你，被污染了么?鑒定正確么？用它做研究會影響實驗結(jié)果么?據(jù)統(tǒng)計約30%細胞系被交叉污染或錯誤辨識，只因使用了交叉污染或錯誤辨識的細胞而導致研究結(jié)論錯誤、結(jié)果不可重復、臨床細胞治療災難性后果……，這將浪費大量時間、精力和金錢。世人皆知，細胞身嬌體貴難養(yǎng)活，養(yǎng)好細胞實屬不易。而這其中最煩的是污染、最怕的是掉包。因為盡管研究僧們有方法把一切污...

安諾倫代理Atlas Antibodies品牌產(chǎn)品——活動好價熱銷中

AtlasAntibodies是提供人類蛋白圖譜(HPA)認證抗體的供應商。傳承HPA優(yōu)秀科研基因，擁有強大的供應能力，提供針對所有人類蛋白質(zhì)的高品質(zhì)抗體。HPA項目于2003年由瑞典研究人員發(fā)起，運用人類蛋白抗體和轉(zhuǎn)錄組學，對人體正常及癌變細胞組織樣本進行免疫染色(IHC)，建立shi界上第一個以IHC染色結(jié)果為主的、可供開放訪問的人類蛋白圖譜數(shù)據(jù)庫，以推動人類在新型診斷、治療靶點和創(chuàng)新藥等領域的探索。該項目成立之初便在科學界引起強烈反響，無數(shù)科學家希望獲得這些抗體用于研究...

噬菌體繁殖有哪些特點？

1.毒性噬菌體指在宿主菌體內(nèi)復制增殖，產(chǎn)生許多子代噬菌體，并最終裂解細菌。毒性噬菌體的增殖方式是復制，其增殖過程經(jīng)歷吸附穿入、生物合成和成熟釋放3個階段。進入菌細胞內(nèi)的噬菌體核酸首先經(jīng)早期轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生早期蛋白質(zhì)，并復制子代核酸，再進行晚期轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生噬菌體的結(jié)構(gòu)蛋白。子代噬菌體達到一定數(shù)量時，由于噬菌體合成酶類的溶解，菌細胞突然裂解，釋放出的噬菌體再感染其他敏感細菌。2.溫和噬菌體感染宿主菌后并不增殖。其基因整合于細菌染色體上，即前噬菌體，隨細菌染色體的復制而復制，并隨細菌分裂而分配...